Novel Coronavirus (SARS-CoV-2) កញ្ចប់ PCR ច្រើនម៉ោងពិតប្រាកដ
ឧបករណ៍ PCR ដែលត្រៀមរួចជាស្រេចដែលមានភាពរសើបខ្លាំងនេះមាននៅក្នុងទម្រង់ lyophilized (ដំណើរការស្ងួតត្រជាក់) សម្រាប់ការផ្ទុករយៈពេលវែង។ឧបករណ៍នេះអាចដឹកជញ្ជូន និងរក្សាទុកនៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់ និងមានស្ថេរភាពរយៈពេលមួយឆ្នាំ។បំពង់នីមួយៗនៃ premix មានផ្ទុកនូវសារធាតុប្រតិកម្មទាំងអស់ដែលត្រូវការសម្រាប់ការពង្រីក PCR រួមទាំង Reverse-transcriptase, Taq polymerase, primers, probes, និង dNTPs substrates។វាគ្រាន់តែត្រូវការបន្ថែមទឹកចម្រោះ 13ul និង 5ul ចំរាញ់ RNA គំរូ បន្ទាប់មកវាអាចត្រូវបានដំណើរការ និងពង្រីកនៅលើឧបករណ៍ PCR ។
ម៉ាស៊ីន qPCR គួរតែបំពេញតាមតម្រូវការដូចខាងក្រោមៈ
1. សម 8 បន្ទះ PCR បំពង់ បរិមាណ 0.2 មីលីលីត្រ
2. មានបណ្តាញរាវរកច្រើនជាងបួន៖
| ឆានែល | ការរំភើបចិត្ត (nm) | ការបំភាយ (nm) | ថ្នាំជ្រលក់មុនកំណត់ |
| 1. | ៤៧០ | ៥២៥ | FAM, SYBR Green I |
| 2 | ៥២៣ | ៥៦៤ | VIC, HEX, TET, JOE |
| 3. | ៥៧១ | ៦២១ | ROX, TEXAS-RED |
| 4 | ៦៣០ | ៦៧០ | CY5 |
PCR-វេទិកា៖
ប្រព័ន្ធ PCR 7500Real-Time, Biorad CF96, iCycler iQ™ Real-Time PCR Detection System, Stratagene Mx3000P, Mx3005P
ភាពលំបាកនៃការដឹកជញ្ជូនខ្សែសង្វាក់ត្រជាក់នៃសារធាតុរាវរកអាស៊ីតនុយក្លេអ៊ីក Novel Coronavirus
នៅពេលដែលសារធាតុរាវរកអាស៊ីតនុយក្លេអ៊ីកធម្មតាត្រូវបានដឹកជញ្ជូនក្នុងចម្ងាយឆ្ងាយ ការផ្ទុក និងការដឹកជញ្ជូនខ្សែសង្វាក់ត្រជាក់ (-20±5) ℃ គឺត្រូវបានទាមទារ ដើម្បីធានាបាននូវជីវសកម្មនៃអង់ស៊ីមនៅក្នុងសារធាតុ reagents នៅតែសកម្ម។ដើម្បីប្រាកដថាសីតុណ្ហភាពឡើងដល់កម្រិតស្តង់ដារ ទឹកកកស្ងួតជាច្រើនគីឡូក្រាមត្រូវការជាចាំបាច់សម្រាប់ប្រអប់នីមួយៗនៃសារធាតុធ្វើតេស្តអាស៊ីតនុយក្លេអ៊ីក ទោះបីជាតិចជាង 50 ក្រាមក៏ដោយ ប៉ុន្តែវាអាចមានរយៈពេលត្រឹមតែពីរឬបីថ្ងៃប៉ុណ្ណោះ។តាមទស្សនៈនៃការអនុវត្តឧស្សាហកម្ម ទម្ងន់ជាក់ស្តែងនៃសារធាតុដែលចេញដោយអ្នកផលិតគឺតិចជាង 10% (ឬតិចជាងតម្លៃនេះ) នៃធុង។ទម្ងន់ភាគច្រើនបានមកពីទឹកកកស្ងួត ថង់ទឹកកក និងប្រអប់ស្នោ ដូច្នេះហើយតម្លៃនៃការដឹកជញ្ជូនគឺខ្ពស់ណាស់។
នៅខែមីនាឆ្នាំ 2020 មេរោគ COVID-19 បានចាប់ផ្តើមផ្ទុះឡើងជាទ្រង់ទ្រាយធំនៅក្រៅប្រទេស ហើយតម្រូវការសម្រាប់សារធាតុរាវរកអាស៊ីតនុយក្លេអ៊ីក Novel Coronavirus បានកើនឡើងយ៉ាងខ្លាំង។ទោះបីជាមានការចំណាយខ្ពស់ក្នុងការនាំចេញសារធាតុ reagents នៅក្នុងខ្សែសង្វាក់ត្រជាក់ក៏ដោយ ក្រុមហ៊ុនផលិតភាគច្រើននៅតែអាចទទួលយកវាបានដោយសារតែបរិមាណច្រើន និងប្រាក់ចំណេញខ្ពស់។
ទោះជាយ៉ាងណាក៏ដោយ ជាមួយនឹងការធ្វើឱ្យប្រសើរឡើងនូវគោលនយោបាយនាំចេញជាតិសម្រាប់ផលិតផលប្រឆាំងនឹងជំងឺរាតត្បាត ក៏ដូចជាការធ្វើឱ្យប្រសើរឡើងនូវការគ្រប់គ្រងជាតិលើលំហូរនៃមនុស្ស និងភស្តុភារ មានការពន្យារពេល និងភាពមិនច្បាស់លាស់នៅក្នុងពេលវេលាដឹកជញ្ជូននៃសារធាតុ reagents ដែលបណ្តាលឱ្យមានបញ្ហាផលិតផលលេចធ្លោបង្កឡើង។ ដោយការដឹកជញ្ជូន។ការពន្យាពេលនៃការដឹកជញ្ជូន (ពេលវេលាដឹកជញ្ជូនប្រហែលកន្លះខែគឺជារឿងធម្មតាណាស់) នាំឱ្យផលិតផលបរាជ័យជាញឹកញាប់នៅពេលដែលផលិតផលទៅដល់អតិថិជន។នេះបានបង្កបញ្ហាដល់សហគ្រាសនាំចេញសារធាតុអាស៊ីត nucleic ភាគច្រើន។
បច្ចេកវិជ្ជា Lyophilized សម្រាប់ reagent PCR បានជួយការដឹកជញ្ជូនសារធាតុ reagent រកឃើញអាស៊ីតនុយក្លេអ៊ីក Novel Coronavirus នៅទូទាំងពិភពលោក
សារធាតុ lyophilized PCR អាចត្រូវបានដឹកជញ្ជូន និងរក្សាទុកនៅសីតុណ្ហភាពបន្ទប់ ដែលមិនត្រឹមតែអាចកាត់បន្ថយថ្លៃដឹកជញ្ជូនប៉ុណ្ណោះទេ ប៉ុន្តែថែមទាំងជៀសវាងបញ្ហាគុណភាពដែលបណ្តាលមកពីដំណើរការដឹកជញ្ជូនផងដែរ។ដូច្នេះ lyophilizing reagent គឺជាមធ្យោបាយដ៏ល្អបំផុតដើម្បីដោះស្រាយបញ្ហានៃការដឹកជញ្ជូននាំចេញ។
Lyophilization ពាក់ព័ន្ធនឹងការបង្កកសូលុយស្យុងចូលទៅក្នុងសភាពរឹង ហើយបន្ទាប់មក sublimate និងបំបែកចំហាយទឹកនៅក្រោមលក្ខខណ្ឌខ្វះចន្លោះ។សូលុយស្យុងស្ងួតនៅតែមាននៅក្នុងធុងដែលមានសមាសភាពនិងសកម្មភាពដូចគ្នា។បើប្រៀបធៀបជាមួយសារធាតុរាវធម្មតា សារធាតុរាវរកឃើញអាស៊ីតនុយក្លេអ៊ីក Novel Coronavirus ដែលមានសមាសធាតុ lyophilized ពេញលេញដែលផលិតដោយ Liming Bio មានលក្ខណៈដូចខាងក្រោម៖
ស្ថេរភាពកំដៅខ្លាំង៖វាអាចជាមួយនឹងការព្យាបាលដោយឈរនៅ 56 ℃សម្រាប់រយៈពេល 60 ថ្ងៃហើយ morphology និងដំណើរការនៃ reagent នៅតែមិនផ្លាស់ប្តូរ។
ការផ្ទុកនិងការដឹកជញ្ជូនសីតុណ្ហភាពធម្មតា៖មិនត្រូវការខ្សែសង្វាក់ត្រជាក់ មិនចាំបាច់រក្សាទុកនៅសីតុណ្ហភាពទាបមុនពេលបិទជិត បញ្ចេញទំហំផ្ទុកត្រជាក់ពេញលេញ។
រួចរាល់សម្រាប់ប្រើប្រាស់៖lyophilizing នៃសមាសភាគទាំងអស់, មិនត្រូវការការកំណត់រចនាសម្ព័ន្ធប្រព័ន្ធ, ជៀសវាងការបាត់បង់នៃសមាសភាគដែលមាន viscosity ខ្ពស់ដូចជាអង់ស៊ីម។
គោលដៅច្រើនក្នុងបំពង់តែមួយ៖គោលដៅនៃការរកឃើញមានគ្របដណ្តប់លើហ្សែនថ្មីនៃមេរោគ ORF1ab, ហ្សែន N, ហ្សែន S ដើម្បីចៀសវាងការចម្លងមេរោគ។ដើម្បីកាត់បន្ថយភាពអវិជ្ជមានមិនពិត ហ្សែន RNase P របស់មនុស្សត្រូវបានគេប្រើជាការគ្រប់គ្រងផ្ទៃក្នុង ដើម្បីបំពេញតាមតម្រូវការគ្លីនិកសម្រាប់ការត្រួតពិនិត្យគុណភាពគំរូ។
